فنیل گالاکتوزید CAS: 2818-58-8

تأثیر بر فعالیت آنزیم: فنیل گالاکتوزید معمولاً برای اندازه‌گیری فعالیت آنزیم بتا-گالاکتوزیداز استفاده می‌شود. هنگامی که فنیل گالاکتوزید توسط بتا-گالاکتوزیداز هیدرولیز می‌شود، پارا-نیتروفنول آزاد می‌کند. تجمع پارا-نیتروفنول را می‌توان به صورت کمی اندازه‌گیری کرد و بینش‌هایی در مورد فعالیت بتا-گالاکتوزیداز ارائه داد. این اثر در کاربردهایی مانند سنجش آنزیم و سیستم‌های غربالگری مورد استفاده قرار می‌گیرد.

آنالیز بیان ژن: فنیل گالاکتوزید اغلب به عنوان سوبسترا در آزمایش‌های زیست‌شناسی مولکولی برای مطالعه بیان ژن استفاده می‌شود. ژن lacZ که بتا-گالاکتوزیداز را کد می‌کند، معمولاً با توالی‌های تنظیمی سایر ژن‌های مورد نظر ترکیب می‌شود. بیان ژن lacZ و هیدرولیز فنیل گالاکتوزید توسط بتا-گالاکتوزیداز می‌تواند الگوی بیان و سطح ژن هدف مورد مطالعه را نشان دهد.

سیستم‌های غربالگری: فنیل گالاکتوزید جزء مهمی از سیستم‌های غربالگری است که از فعالیت بتا-گالاکتوزیداز استفاده می‌کنند. یک نمونه‌ی شناخته‌شده، روش غربالگری آبی-سفید است که برای شناسایی سلول‌های نوترکیب یا تغییرشکل‌یافته در آزمایش‌های زیست‌شناسی مولکولی استفاده می‌شود. کلنی‌هایی که با موفقیت DNA نوترکیب را جذب کرده‌اند یا نوترکیبی ژنتیکی را پشت سر گذاشته‌اند، بتا-گالاکتوزیداز را بیان می‌کنند که منجر به هیدرولیز فنیل گالاکتوزید و تشکیل رنگ آبی می‌شود.

خالص‌سازی پروتئین: در برخی موارد، فنیل گالاکتوزید می‌تواند به عنوان لیگاند برای کروماتوگرافی تمایلی برای خالص‌سازی پروتئین‌هایی که به طور خاص به بتا-گالاکتوزیداز متصل می‌شوند یا توسط آن فعال می‌شوند، استفاده شود. پروتئین مورد نظر ممکن است دارای یک برچسب تمایلی یا یک برچسب ادغامی حاوی دامنه اتصال بتا-گالاکتوزیداز باشد. با عبور مخلوط پروتئین از ستونی با فنیل گالاکتوزید تثبیت‌شده، پروتئین مورد نظر می‌تواند به صورت انتخابی حفظ و متعاقباً شسته شود.