فنیل گالاکتوزید CAS:2818-58-8

اثر بر فعالیت آنزیم: فنیل گالاکتوزید معمولاً برای اندازه گیری فعالیت آنزیم β-گالاکتوزیداز استفاده می شود.هنگامی که فنیل گالاکتوزید توسط β-گالاکتوزیداز هیدرولیز می شود، p-nitrophenol آزاد می کند.تجمع p-nitrophenol را می توان به صورت کمی اندازه گیری کرد و بینشی در مورد فعالیت β-گالاکتوزیداز ارائه می دهد.این اثر در کاربردهایی مانند سنجش آنزیمی و سیستم های غربالگری مهار می شود.

تجزیه و تحلیل بیان ژن: فنیل گالاکتوزید اغلب به عنوان یک بستر در آزمایشات زیست شناسی مولکولی برای مطالعه بیان ژن استفاده می شود.ژن lacZ که بتا-گالاکتوزیداز را کد می کند، معمولاً با توالی های تنظیمی سایر ژن های مورد علاقه ترکیب می شود.بیان ژن lacZ و هیدرولیز فنیل گالاکتوزید توسط β-گالاکتوزیداز می تواند نشان دهنده الگوی بیان و سطح ژن هدف مورد مطالعه باشد.

سیستم های غربالگری: فنیل گالاکتوزید جزء مهمی از سیستم های غربالگری است که از فعالیت β-گالاکتوزیداز استفاده می کند.یکی از نمونه های شناخته شده، روش غربالگری آبی-سفید است که برای شناسایی سلول های نوترکیب یا تبدیل شده در آزمایش های زیست شناسی مولکولی استفاده می شود.کلنی هایی که DNA نوترکیب را با موفقیت دریافت کرده اند یا تحت نوترکیبی ژنتیکی قرار گرفته اند، β-گالاکتوزیداز را بیان می کنند که منجر به هیدرولیز فنیل گالاکتوزید و تشکیل رنگ آبی می شود.

خالص سازی پروتئین: در برخی موارد، فنیل گالاکتوزید می تواند به عنوان لیگاند برای کروماتوگرافی میل ترکیبی برای خالص سازی پروتئین هایی که به طور خاص به β-گالاکتوزیداز متصل می شوند یا توسط آن فعال می شوند، استفاده شود.پروتئین مورد نظر ممکن است دارای یک تگ میل ترکیبی یا یک تگ همجوشی حاوی دامنه اتصال بتا گالاکتوزیداز باشد.با عبور دادن مخلوط پروتئین از یک ستون با فنیل گالاکتوزید بی حرکت، می توان پروتئین مورد نظر را به طور انتخابی حفظ و سپس شستشو داد.